1 การตรวจสอบกลุ่มพฤกษเคมีด้วยวิธี Thin-Layer chromatography (TLC)

สภาวะทดลอง (7)

สารละลายตัวอย่าง: สารสกัดหญ้ารีแพร์ด้วยเฮกเซน คลอโรฟอร์ม อะซีโตน เอทานอล และน้ำ ความเข้มข้น 1 มก/มล. ในเมทานอล  

วัฏภาคเคลื่อนที่: chloroform:methanol (9:1) และethyl acetate:methanol:formic acid: water (50:3:3:6)

น้ำยาตรวจสอบ: 1. anisaldehyde reagent

2. natural product reagent

3. Dragendorff’s reagent

Detector: UV 254 และ 366 นาโนเมตร

2 การวิเคราะห์องค์ประกอบทางเคมีของสารสกัดด้วยวิธี Gas chromatography-Mass spectrometer (GC-MS)

สภาวะทดลอง (7)

column: Thermo TG-5s-LMS 

วัฏภาคเคลื่อนที่: แก๊สฮีเลียม, อัตราการไหล 1 มล./นาที

injection volume: 4 มคล., อุณหภูมิ 200องศาเซลเซียส

อุณหภูมิ: เริ่มต้นที่ 60 องศาเซลเซียส คงที่เป็นเวลา 5 นาที จากนั้นเพิ่มอุณหภูมิ จนถึง 300 องศาเซลเซียส ด้วยอัตรา 8 องศาเซลเซียส/นาที 

ยังไม่พบรายงานการศึกษาทางคลินิกในด้านเครื่องสำอางและผลิตภัณฑ์สำหรับใช้ภายนอกของหญ้ารีแพร์

1 การศึกษาเกี่ยวกับผิวหน้า

1.1 ทำให้ผิวหน้าขาว (F001)

ยับยั้งเอนไซม์ไทโรซิเนส 

การทดสอบฤทธิ์ของสารสกัดจากหญ้ารีแพร์ (ตัวอย่างพืชจากจังหวัดปราจีนบุรีและจังหวัดพระนครศรีอยุธยา ไม่ระบุ voucher specimen) ต่อการทำงานของเอนไซม์ไทโรซิเนสจากเห็ดพบว่าสารสกัด 95% เอทานอล ที่เตรียมด้วยวิธีแช่สกัดส่วนเหนือดินของหญ้ารีแพร์ใน 95% เอทานอล อัตราส่วน 1:10 เป็นเวลา 72 ชม. มีฤทธิ์อย่างอ่อนในการยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ ด้วยค่า IC50 เท่ากับ 3,756±169.14 มก./มล ซึ่งน้อยกว่าสารมาตรฐาน kojic acid (IC50 = 0.025±0.005 มก./มล.) (9)

1.2 ลดเลือนริ้วรอยบนใบหน้า (F008)

ยับยั้งเอนไซม์คอลลาจีเนส

สารสกัด 95% เอทานอลจากส่วนเหนือดินของหญ้ารีแพร์ (ตัวอย่างพืชจากจังหวัดปราจีนบุรีและจังหวัดพระนครศรีอยุธยา ไม่ระบุ voucher specimen)ที่เตรียมสารสกัดด้วยวิธีแช่สกัดใน 95%เอทานอล อัตราส่วน 1:10 เป็นเวลา 72 ชม.แสดงฤทธิ์ยับยั้งการทำงานของเอนไซม์คอลลาจีเนสได้ตามขนาดของสารสกัดที่ได้รับ โดยพบค่า IC50เท่ากับ 1.26±1.01 มก./มล. ใกล้เคียงกับสารมาตรฐานกรดแอสคอบิก (IC50 = 1.24±0.25 มก./มล.) (9)

ยับยั้ง gelatinolytic activity

สารสกัด95% เอทานอลจากหญ้ารีแพร์มีฤทธิ์ยับยั้บการย่อยโปรตีนเจลาตินและคอลลาเจนในผิวผ่านการยับยั้งการทำงานของ matrix metalloproteinase-2 (MMP-2)  การทดสอบในเซลล์ผิวหนังของมนุษย์ (human skin fibroblast) ด้วยการบ่มสารสกัด 95%เอทานอลจากหญ้ารีแพร์ ที่เตรียมสารสกัดด้วยวิธีแช่สกัดใน 95% เอทานอล อัตราส่วน 1:10 เป็นเวลา 72 ชม. (ตัวอย่างพืชจากจังหวัดปราจีนบุรีและจังหวัดพระนครศรีอยุธยา ไม่ระบุ voucher specimen) ขนาด 1,000 มคก./มล. เป็นเวลา 48 ชั่วโมง พบว่าสารสกัดจากหญ้ารีแพร์ยับยั้งการทำงานของ MMP-2 ได้ 100% เทียบเท่ากับการใช้สารมาตรฐานกรดแอสคอบิกขนาด 100 มคก./มล. (9)

1.3 ต้านอนุมูลอิสระ (F007)

การศึกษาเปรียบเทียบวิธีการเตรียมสารสกัดและฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดจากส่วนใบ ก้าน และรากของหญ้ารีแพร์ (ตัวอย่างพืชจากจังหวัดตรัง ไม่ระบุ voucher specimen) ด้วยวิธีเขย่าด้วยคลื่นเสียง (sonication) เป็นเวลา 1, 3, 6, 9 และ 24 ชม. ด้วยตัวทำละลายที่แตกต่างกัน 2 ชนิด คือ 95%เอทานอล และน้ำกลั่น ผลการวิเคราะห์ปริมาณฟีนอลิกรวมในสารสกัดด้วยวิธี Folin-Ciocalteu พบว่าสารสกัด 95% เอทานอลจากส่วนใบมีปริมาณสารฟีนอลิกมากที่สุด คือ 30.33-49.63 มก. สมมูลกรดแกลลิค/ก. รองลงมาคือสารสกัดเอทานอลจากก้าน สารสกัดเอทานอลจากราก สารสกัดน้ำจากใบ สารสกัดน้ำจากก้าน และสารสกัดน้ำจากราก ซึ่งมีปริมาณฟีนอลิกรวมอยู่ในช่วงระหว่าง 24.38-42.76, 11.98-34.22, 11.95-23.65, 11.83-20.49 และ 0.81-7.44 มก.สมมูลกรดแกลลิค/ก. ตามลำดับ ผลการทดสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดส่วนใบ ก้าน และรากด้วยวิธี 2, 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical (DPPH)scavenging assay พบว่าสารสกัดเอทานอลจากส่วนใบมีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระสูงที่สุด ด้วยค่า IC50เท่ากับ 0.105 มล./มล. ซึ่งใกล้เคียงกับสารมาตรฐานโทรล๊อกซ์ (IC50เท่ากับ 0.102 มล./มล.) รองลงมาคือสารสกัดเอทานอลจากก้าน สารสกัดเอทานอลจากราก สารสกัดน้ำจากก้าน สารสกัดน้ำจากใบ และสารสกัดน้ำจากราก ด้วยค่า IC50เท่ากับ 0.197, 0.284, 0.896, 0.431 และ 1.734 มล./มล. ตามลำดับ (8)

การศึกษาฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดเอทานอลและสารสกัดน้ำจากหญ้ารีแพร์ (ตัวอย่างพืชจากจังหวัดปราจีนบุรีและจังหวัดพระนครศรีอยุธยา ไม่ระบุ voucher specimen)เตรียมสารสกัดเอทานอลด้วยวิธีแช่สกัดใน 95% เอทานอล ในอัตราส่วน 1:10 เป็นเวลา 72 ชม. และสารสกัดน้ำเตรียมโดยต้มหญ้ารีแพร์แห้งในน้ำกลั่น ที่อุณหภูมิ 100 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 2 ชั่วโมง ทำการทดสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดด้วยวิธี DPPH assay, metal ion chelating assay และผลต่อการยับยั้ง lipid peroxidation ผลการทดสอบพบว่าสารสกัด 95% เอทานอล แสดงฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระได้ดีกว่าสารสกัดน้ำ โดยพบค่าความเข้มข้นของสารสกัดต่อการยับยั้งอนุมูลอิสระด้วยวิธี DPPH, chelating activity และ lipid peroxidation inhibition เท่ากับ 1.39±0.50, 366.95±13.47 และ 0.99±0.26มก./มล. ตามลำดับ ส่วนสารสกัดน้ำ มีค่าความเข้มข้นของสารสกัดต่อการยับยั้งอนุมูลอิสระเท่ากับ 2.14±0.31, >1,000 และ 1.06±0.15 มก./มล. ตามลำดับ (9)

การศึกษาฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดจากหญ้ารีแพร์ (ไม่ระบุ voucher specimen) ด้วยวิธีการแช่สกัดใน 70% เอทานอล ในอัตราส่วน 1:10 เป็นเวลา 3 วันและการแช่สกัดในน้ำกลั่นที่อุณหภูมิ 80 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 1 ชั่วโมงจากนั้นนำสารสกัดเอทานอลและสารสกัดน้ำไปสกัดต่อด้วยเอทิลอะซีเตท ในอัตราส่วน 1:2 ผลการศึกษาพบว่าสารสกัดชั้นเอทิลอะซีเตทที่แยกได้จากสารสกัดเอทานอลมีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระสูงที่สุด โดยพบค่า IC50เท่ากับ 0.792และ 0.400มก./มล. เมื่อทดสอบด้วยวิธี DPPH และ 2,2′-Azino-bis (3- ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) cation radicalscavenging (ABTS) assay ตามลำดับ รองลงมาคือสารสกัดชั้นเอทิลอะซีเตทที่แยกได้จากสารสกัดน้ำ สารสกัด70%เอทานอล และสารสกัดน้ำ สอดคล้องกับผลการวิเคราะห์ปริมาณฟีนอลิกรวมด้วยวิธี Folin-Ciocalteu พบปริมาณสารฟีนอลิกในสารสกัดชั้นเอทิลอะซีเตทที่แยกได้จากสารสกัดเอทานอล สารสกัดชั้นเอทิลอะซีเตทที่แยกได้จากสารสกัดน้ำ สารสกัด70%เอทานอล และสารสกัดน้ำ เท่ากับ 14.38, 12.71, 9.97และ 8.43มก.สมมูลกรดแกลลิก/ก.สารสกัด ตามลำดับ (10)

การศึกษาฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระสารสกัดหญ้ารีแพร์ (ไม่ระบุ voucher specimen) ทำการเตรียมสารสกัดโดยใช้โพรพิลีนไกลคอลความเข้มข้น 30%, 50%, 70% เป็นตัวทำละลาย ผลการศึกษาพบว่าสารสกัด 70% โพรพิลีนไกลคอล มีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระได้ดีที่สุดด้วยค่า IC50เท่ากับ 56.02 และ 199.62 มก./มล. เมื่อทดสอบด้วยวิธี DPPHและ ABTS assay ตามลำดับ การวิเคราะห์ปริมาณสารสำคัญในสารสกัดหญ้ารีแพร์ด้วย 70% โพรพิลีนไกลคอลพบปริมาณฟีนอลิกรวมเท่ากับ 0.42 มก.สมมูลกรดแกลลิก/ก.สารสกัด และมีปริมาณฟลาโวนอยด์รวม 0.24 มก.สมมูลคาเตชิน/ก. สารสกัด (11)

2 การศึกษาเกี่ยวกับผิวกาย

2.1 ต้านเชื้อแบคทีเรีย (S005)

การศึกษาฤทธิ์ต้านเชื้อแบคทีเรียของสารสกัดจากหญ้ารีแพร์ (ไม่ระบุ voucher specimen) ด้วยวิธีการแช่สกัดใน 70% เอทานอล ในอัตราส่วน 1:10 เป็นเวลา 3 วันและแช่สกัดในน้ำกลั่นที่อุณหภูมิ 80 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 1 ชั่วโมงจากนั้นนำสารสกัดเอทานอลและสารสกัดน้ำไปสกัดต่อด้วยเอทิลอะซีเตท ในอัตราส่วน 1:2 จากนั้นนำสารสกัดที่ได้มาทดสอบฤทธิ์ต้านเชื้อแบคทีเรีย Bacillus cereus, Straphylococus aureus, Enterobactor aerogenosa, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Listeria monocytogenes, L. innocua และ Samonella typhimuriumด้วยวิธี agar well diffusion พบว่าสารสกัดชั้นเอทิลอะซีเตทที่แยกได้จากสารสกัดเอทานอล สามารถยับยั้งการเจริญของเชื้อ B. cereus ด้วยค่าเฉลี่ยโซนใส 6.5±0.3 มม. และมีค่าความเข้มข้นต่ำสุดของสารสกัดที่สามารถยับยั้งเชื้อได้ (MIC) เท่ากับ 6.25 มก./มล. และในการศึกษานี้ไม่พบฤทธิ์ต้านเชื้อแบคทีเรียของสารสกัดชั้นเอทิลอะซีเตทที่แยกได้จากสารสกัดน้ำ สารสกัด 70%เอทานอล และสารสกัดน้ำของหญ้ารีแพร์ (10)

ยังไม่พบรายงานการศึกษาพิษวิทยาและความปลอดภัยของหญ้ารีแพร์

ยังไม่มีรายงานข้อห้ามใช้ในรูปแบบของเครื่องสำอาง

ยังไม่มีรายงานข้อควรระวังการใช้ในรูปแบบของเครื่องสำอาง

ยังไม่มีรายงานอาการไม่พึงประสงค์จากการใช้ในรูปแบบของเครื่องสำอาง

ผลิตภัณฑ์แชมพูที่เตรียมโดยนำผงฝักส้มป่อย 10 ก. ผสมในน้ำเปล่า 240 มล. สระผมวันเว้นวัน ทิ้งแชมพูไว้บนหนังศีรษะ 20 นาที แล้วล้างออกด้วยน้ำสะอาด เป็นเวลา 28 วัน มีผลลดความถี่และขนาดของรังแค ลดการหลุดร่วงของเส้นผม อาการคันหนังศีรษะ และความมันของเส้นผม (13)

DIP (THAILAND-TH)